本發(fā)明涉及天然提取物的應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及一種蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物的制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1、機(jī)體在一定的條件下，受病因損害作用后，因自穩(wěn)調(diào)節(jié)紊亂會(huì)發(fā)生異常的生命活動(dòng)，導(dǎo)致疾病的產(chǎn)生。疾病的治療主要以藥物治療為主，而藥物在治療疾病的同時(shí)，也會(huì)導(dǎo)致毒副作用的產(chǎn)生，如毒性反應(yīng)、代謝性影響、過(guò)敏反應(yīng)等。藥物會(huì)產(chǎn)生毒副作用的主要原因之一是藥物在體內(nèi)與非目的靶標(biāo)的結(jié)合，比如普萘洛爾(propranolol)，是一種比較老的降壓藥，屬于非選擇性β受體阻滯劑，因β受體遍布人體，且可細(xì)分為β1和β2受體，普萘洛爾對(duì)兩種受體都有拮抗作用，其中心臟β1受體的阻滯，起到降血壓、緩解心率失常等效果，但是在呼吸道對(duì)β2受體的阻滯，會(huì)使支氣管平滑肌收縮，產(chǎn)生呼吸困難等反應(yīng)，同時(shí)胃腸的β2受體的拮抗，會(huì)造成腹瀉等不良反應(yīng)，這些不良反應(yīng)都是與非目的蛋白結(jié)合造成的。
2、磷酸二酯酶四型(phosphodiesteras?type?4，pde4)特異性水解camp為5'-amp，調(diào)節(jié)細(xì)胞中的camp濃度處于適當(dāng)范圍，維持正常的生理活動(dòng)。pde4主要分布于人體各炎癥細(xì)胞、免疫細(xì)胞和氣道平滑肌細(xì)胞內(nèi)，現(xiàn)今治療pde4型相關(guān)的疾病(如特異性皮炎、銀屑病、哮喘、慢性阻塞性肺疾病和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病等)主要是通過(guò)抑制pde4的活性來(lái)抑制炎癥細(xì)胞，達(dá)到治療疾病的目的。
3、pde4家族又可以分為pde-4a、pde-4b、pde-4c、pde-4d這四個(gè)亞型，目前，pde4抑制劑已被開(kāi)發(fā)成抗炎的藥物，但是pde4抑制劑一般都不能區(qū)別pde4的亞型，在體內(nèi)均可與不同亞型進(jìn)行結(jié)合，在這四個(gè)亞型中，pde-4b為主要的抗炎靶點(diǎn)，而pde-4d與胃腸道不適有關(guān)，是導(dǎo)致嘔吐發(fā)生的主要亞型，當(dāng)pde4抑制劑在體內(nèi)與pde-4b的抗炎靶點(diǎn)結(jié)合時(shí)，也會(huì)與pde-4d的靶點(diǎn)結(jié)合，從而導(dǎo)致胃腸道不適，引發(fā)不良反應(yīng)，如pde4抑制劑羅氟司特(roflumilast)，臨床上主要用于治療肺部的炎癥，尤其是針對(duì)于哮喘和慢性阻塞性肺病的治療上，但服用此類藥物會(huì)引起腹瀉、惡心等胃腸道不良反應(yīng)，限制了其使用。因此如何克服這些pde4抑制劑存在的不良反應(yīng)，研究特異性抑制劑成為研究的熱點(diǎn)之一。
4、銀屑病俗稱“牛皮癬”，是一種具有多基因遺傳背景的慢性復(fù)發(fā)性炎癥性皮膚疾病，是pde4型相關(guān)疾病中的其中一種。據(jù)統(tǒng)計(jì)，銀屑病在全球發(fā)病率約為2％，我國(guó)目前約有650萬(wàn)銀屑病患者。銀屑病的發(fā)生是局部皮損炎癥伴隨系統(tǒng)性炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，除了影響皮膚，部分銀屑病患者同時(shí)伴有關(guān)節(jié)炎、糖尿病和合并高血壓等代謝類疾病。
5、天然產(chǎn)物是尋找特異性抑制劑的重要來(lái)源之一，對(duì)于開(kāi)發(fā)新一代療效強(qiáng)、副作用小的特異性pde4抑制劑具有重要的意義。墨旱蓮為菊科鱧腸屬植物鱧腸(ecliptaprostrata?l.)的干燥地上部分，又名鱧腸、金陵草，具有滋補(bǔ)肝腎、止血涼血等傳統(tǒng)功效。屬止血藥下屬分類的涼血止血藥?，F(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)研究證明，墨旱蓮有抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，保肝，增強(qiáng)機(jī)體免疫，抗骨質(zhì)疏松，降血糖和降血脂等作用。目前對(duì)其的研究主要是化學(xué)成分、藥理作用、體內(nèi)代謝、質(zhì)量控制、活性成分等相關(guān)制備工藝及藥理活性方面，經(jīng)檢索，尚未發(fā)現(xiàn)利用墨旱蓮活性成分作為特異性pde4抑制劑的相關(guān)文獻(xiàn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)缺陷，本發(fā)明的目的在于提供墨旱蓮提取物中的蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物，該化合物療效強(qiáng)，毒副作用小，有顯著的緩解銀屑病癥狀的功效。
2、本發(fā)明上述目的通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
3、本發(fā)明的第一方面，是提供一種菊科類植物提取物在治療或/和預(yù)防4型磷酸二酯酶相關(guān)疾病中的應(yīng)用，所述菊科類植物提取物是墨旱蓮提取物。
4、進(jìn)一步地，所述墨旱蓮提取物通過(guò)將墨旱蓮醇提取得到，醇提取的方法如下：稱取墨旱蓮干葉，粉碎成粗粉，加同體積量的醇溶液分別浸泡三次，其中，第一次2-5天，第二和第三次分別各自為1-3天，濾過(guò)，合并濾液，減壓回收醇的有效成分，以石油醚和乙酸乙酯對(duì)上面回收產(chǎn)物進(jìn)行萃取，減壓回收有效成分，余液濃縮至稠膏狀，得到含有效部位的墨旱蓮醇提取物。
5、進(jìn)一步地，所述菊科類植物提取物中蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物在治療或/和預(yù)防4型磷酸二酯酶相關(guān)疾病中的應(yīng)用。
6、進(jìn)一步地，所述蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物為以下式i所示化合物1和化合物2中的一種，化合物1的結(jié)構(gòu)式為以下式i中的1，化合物2的結(jié)構(gòu)式為以下式i中的2；
7、
8、本發(fā)明的第二方面是提供一種蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物的制備方法，包括以下步驟：
9、a.將墨旱蓮干葉粉碎后用甲醇或乙醇溶液浸泡三次，過(guò)濾，合并收集濾液，再減壓濃縮至膏狀獲得墨旱蓮醇提取物；
10、b.將醇提取物加蒸餾水制成混懸液，依次用石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行萃取，乙酸乙酯萃取液減壓濃縮，得到乙酸乙酯萃取浸膏；
11、c.將乙酸乙酯萃取浸膏進(jìn)行柱色譜分離純化，得到單體化合物1和單體化合物2。
12、進(jìn)一步地，所述步驟c包括：
13、1)將乙酸乙酯萃取浸膏經(jīng)硅膠柱色譜分離，分別按體積比5:95、30:70、55:45、80:20和95:5進(jìn)行甲醇-水梯度洗脫，收集體積比為30:70和55:45的甲醇-水洗脫物；
14、2)取體積比為30:70和55:45的甲醇-水洗脫物進(jìn)行ods柱層析，用體積比為20:80、30:70、55:45、65:35和95:5的甲醇-水梯度洗脫，分別收集體積比為30:70和55:45的甲醇-水洗脫物濃縮；
15、3)取甲醇-水洗脫物用半制備型hplc純化，使用甲醇-水為流動(dòng)相，體積比(95～5):(5～95)，得到化合物1和化合物2。
16、本發(fā)明的第三方面是提供一種在制備治療或/和預(yù)防銀屑病的保健品或食品方面的應(yīng)用，所述保健品或食品包含所述蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物。
17、本發(fā)明的第四方面是提供一種治療或/和預(yù)防銀屑病的藥物，所述藥物包含所述菊科類植物提取物或任一所示結(jié)構(gòu)的蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物中的一種或兩種、以及藥學(xué)上可接受的輔料和載體。
18、進(jìn)一步地，所述藥物的劑型為膠囊、片劑、丸劑、顆粒劑、沖劑、噴劑、乳劑和膏劑。
19、本發(fā)明具有以下有益效果：
20、1、本發(fā)明從墨旱蓮提取物中提取出來(lái)的的蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物有顯著的緩解銀屑病癥狀的功效，能夠同時(shí)抑制多種炎癥因子、細(xì)胞因子和與角質(zhì)包膜形成相關(guān)的基因的表達(dá)，從而達(dá)到緩解銀屑病過(guò)度角化伴角化不全、紅斑和鱗屑等，并減少皮膚的炎癥性浸潤(rùn)等癥狀，因此在制備銀屑病治療藥物中具有良好的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景。
21、2、原料來(lái)源于天然植物，對(duì)皮膚皮損部位刺激小，毒性低，副作用少。
1.菊科類植物提取物在治療或/和預(yù)防4型磷酸二酯酶相關(guān)疾病中的應(yīng)用，所述菊科類植物提取物是墨旱蓮提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述墨旱蓮提取物通過(guò)將墨旱蓮醇提取得到，醇提取的方法如下：稱取墨旱蓮干葉，粉碎成粗粉，加同體積量的醇溶液分別浸泡三次，其中，第一次2-5天，第二和第三次分別各自為1-3天，濾過(guò)，合并濾液，減壓回收醇的有效成分，以石油醚和乙酸乙酯對(duì)上面回收產(chǎn)物進(jìn)行萃取，減壓回收有效成分，余液濃縮至稠膏狀，得到含有效部位的墨旱蓮醇提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述菊科類植物提取物中蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物在治療或/和預(yù)防4型磷酸二酯酶相關(guān)疾病中的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物為以下式i所示化合物1和化合物2中的一種，化合物1的結(jié)構(gòu)式為以下式i中的1，化合物2的結(jié)構(gòu)式為以下式i中的2；
5.一種蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物的制備方法，其特征在于，所述步驟c包括：
7.一種在制備治療或/和預(yù)防銀屑病的保健品或食品方面的應(yīng)用，所述保健品或食品包含權(quán)利要求1所述的蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物。
8.一種治療或/和預(yù)防銀屑病的藥物，其特征在于，所述藥物包含權(quán)利要求1所述的菊科類植物提取物或權(quán)利要求4中任一所示結(jié)構(gòu)的蟛蜞菊內(nèi)酯類化合物中的一種或兩種、以及藥學(xué)上可接受的輔料和載體。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物，其特征在于，所述藥物的劑型為膠囊、片劑、丸劑、顆粒劑、沖劑、噴劑、乳劑和膏劑。