本發(fā)明屬于抗腫瘤藥物制備，具體涉及川黨參外泌體及其提取方法和在抗腫瘤中的用途。
背景技術：
1、外泌體是由細胞分泌的納米級囊泡(直徑30nm～200nm)，具有磷脂雙分子層結(jié)構(gòu)，內(nèi)部攜帶核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等生物活性物質(zhì)，能夠介導細胞間信息傳遞并調(diào)控生理功能。目前，動物外泌體在疾病診斷、藥物遞送等領域的研究較為成熟，但其存在免疫原性風險及規(guī)?；苽涑杀靖叩葐栴}，限制了臨床應用。相比之下，植物外泌體因來源廣泛、生物相容性優(yōu)異等特性，逐漸成為新型藥物載體的研究熱點。
2、現(xiàn)有研究表明，植物外泌體(evs)在形態(tài)(直徑40nm～150nm)、結(jié)構(gòu)(杯狀/茶托狀)及內(nèi)含物(mirna、脂質(zhì)、功能蛋白)方面與動物外泌體高度相似，同時兼具低毒性和天然穩(wěn)定性優(yōu)勢，然而，植物外泌體的分泌機制尚未完全闡明，且不同植物品種間外泌體的組成差異顯著，導致其功能驗證與標準化提取技術發(fā)展滯后。
3、并且，目前植物外泌體的研究多集中于模式植物(如西蘭花、葡萄等)，針對傳統(tǒng)藥用植物外泌體的活性成分挖掘及功能研究仍存在系統(tǒng)性不足。
技術實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明從川黨參(codonopsis?tangshen?oliv.)中提取出了川黨參外泌體，并且經(jīng)驗證顯示，該川黨參外泌體具有優(yōu)異的抗腫瘤活性，尤其是對乳腺癌，可以將其用于抗腫瘤藥物的制備中。
2、為了達到上述目的，本發(fā)明可以采用以下技術方案：
3、本發(fā)明一方面提供一種川黨參外泌體，川黨參外泌體由川黨參提取而得，川黨參外泌體粒徑大小為95nm-105nm，形狀為脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)的囊泡。
4、本發(fā)明另一方面提供一種本發(fā)明中的川黨參外泌體的提取方法，其包括：(1)川黨參破碎得到川黨參汁液；(2)川黨參汁液離心得到沉淀；(3)沉淀重懸得到川黨參外泌體。
5、優(yōu)選地，上述提取方法滿足以下條件中的一種或多種：(i)步驟(2)中，離心步驟包括：先將川黨參汁液進行第一次離心，第一次離心后取上清進行第二次離心，第二次離心后取上清進行第三次離心，第三次離心后去上清得沉淀；其中，第一次離心包括：依次在2600×g～3400×g和3600×g～4400×g進行離心；第二次離心的離心力為8000×g～12000×g；第二次離心的離心力為8000×g～12000×g；
6、(ii)步驟(3)中，沉淀重懸后依次使用0.6μm～0.8μm孔徑和0.4μm～0.5μm孔徑過濾得川黨參外泌體。
7、本發(fā)明再一方面提供一種川黨參外泌體制品，川黨參外泌體制品為包含本發(fā)明中川黨參外泌體有效活性成分的不同形態(tài)，川黨參外泌體制品包括懸液、凍干粉、凝膠、乳霜、微膠囊或脂質(zhì)體。
8、本發(fā)明再一方面提供一種抗腫瘤組合物，其包括本發(fā)明中的川黨參外泌體或本發(fā)明中的川黨參外泌體制品。
9、本發(fā)明再一方面提供一種抗腫瘤藥物，其包括本發(fā)明中的川黨參外泌體或本發(fā)明中的川黨參外泌體制品或本發(fā)明中的抗腫瘤組合物。
10、優(yōu)選地，上述抗腫瘤藥物的劑型包括口服液劑、注射劑、片劑、膠囊劑、粉劑、貼劑、噴霧劑、膏劑或栓劑。
11、本發(fā)明再一方面提供一種本發(fā)明中的川黨參外泌體或本發(fā)明中的川黨參外泌體制品的用途，用途包括以下用途中任一種：(a)在制備抗腫瘤藥物中的用途；(b)在抑制腫瘤細胞增殖中的用途。
12、優(yōu)選地，上述用途中，腫瘤為乳腺癌。
13、優(yōu)選地，上述用途中，抗腫瘤藥物的劑型為口服液劑、注射劑、片劑、膠囊劑、粉劑、貼劑、噴霧劑、膏劑或栓劑。
14、本發(fā)明有益效果包括：
15、(1)本發(fā)明提供的川黨參外泌體具有優(yōu)異的抗腫瘤效果，可以顯著抑制腫瘤生長，且抑制腫瘤增殖的效果顯著優(yōu)于川黨參中的常見提取物黨參炔苷(lobetyolin，簡稱lob)。比如，本發(fā)明試驗了在相同條件下，川黨參外泌體處理的4t1(小鼠乳腺癌細胞)腫瘤模型小鼠的腫瘤重量較黨參炔苷處理的4t1腫瘤模型小鼠的腫瘤重量減輕了約57.1％，較pbs溶液處理的模型小鼠的腫瘤重量減輕了約76.9％。
16、(2)本發(fā)明提供的川黨參外泌體的提取方法簡單、穩(wěn)定、高效，適合大規(guī)模生產(chǎn)；并且提取得到的川黨參外泌體純度高，形態(tài)完整，具有良好的生物活性。
1.川黨參外泌體，其特征在于，川黨參外泌體由川黨參提取而得，川黨參外泌體粒徑大小為95nm～105nm，形狀為脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)的囊泡。
2.權利要求1所述的川黨參外泌體的提取方法，其特征在于，包括：(1)川黨參破碎得到川黨參汁液；(2)川黨參汁液離心得到沉淀；(3)沉淀重懸得到川黨參外泌體。
3.根據(jù)權利要求2所述的提取方法，其特征在于，提取方法滿足以下條件中的一種或多種：
4.川黨參外泌體制品，其特征在于，川黨參外泌體制品為包含權利要求1所述的川黨參外泌體有效活性成分的不同形態(tài)，川黨參外泌體制品包括懸液、凍干粉、凝膠、乳霜、微膠囊或脂質(zhì)體。
5.抗腫瘤組合物，其特征在于，包括權利要求1所述的川黨參外泌體或權利要求4所述的川黨參外泌體制品。
6.抗腫瘤藥物，其特征在于，包括權利要求1所述的川黨參外泌體或權利要求4所述的川黨參外泌體制品或權利要求5所述的抗腫瘤組合物。
7.根據(jù)權利要求6所述的抗腫瘤藥物，其特征在于，抗腫瘤藥物的劑型包括口服液劑、注射劑、片劑、膠囊劑、粉劑、貼劑、噴霧劑、膏劑或栓劑。
8.權利要求1所述的川黨參外泌體或權利要求4所述的川黨參外泌體制品的用途，用途包括以下用途中任一種：
9.根據(jù)權利要求8所述的用途，其特征在于，腫瘤為乳腺癌。
10.根據(jù)權利要求8或9所述的用途，其特征在于，抗腫瘤藥物的劑型為口服液劑、注射劑、片劑、膠囊劑、粉劑、貼劑、噴霧劑、膏劑或栓劑。