本發(fā)明涉及生物，具體涉及一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動脈粥樣硬化造模方法。
背景技術(shù)：
1、動脈粥樣硬化是冠心病、中風等心血管疾病的主要病理基礎(chǔ)。apoe-/-小鼠作為研究動脈粥樣硬化的經(jīng)典模型，通常依靠單純高脂飲食誘導(dǎo)斑塊形成，但該方法需要較長的誘導(dǎo)時間，大約12周才能完成，所耗費的時間和物力成本比較高。近年來，已有研究嘗試使用不同的飲食干預(yù)來加速模型的建立，但多數(shù)干預(yù)效果和機制尚不明確。
2、由此，亟需提供一種干預(yù)效果和機制明確、步驟簡單、有效且重復(fù)性良好的造模方法，為動脈粥樣硬化及相關(guān)干預(yù)研究提供更為理想的動物模型。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動脈粥樣硬化造模方法。
2、本發(fā)明提供了一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動脈粥樣硬化造模方法，其采用載脂蛋白e基因敲除(apoe-/-)小鼠作為實驗動物，通過聯(lián)合給予高脂飲食和飲水中添加食品級三氯蔗糖來加速動脈粥樣硬化斑塊的形成；所述三氯蔗糖在飲水中的濃度為2％～3％w/v。
3、進一步的，
4、所述apoe-/-小鼠造模步驟為8周齡雄性小鼠，經(jīng)過1周適應(yīng)期后分組試驗，其中對照組給予常規(guī)高脂飲食和純凈飲水，實驗組在相同高脂飲食條件下給予含有三氯蔗糖的飲水。
5、所述apoe-/-小鼠造模干預(yù)周期為6～8周。
6、所述高脂飲食中脂肪含量為15％，膽固醇含量為5％。
7、本發(fā)明提供了所述的一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動脈粥樣硬化造模方法在制備研究動脈粥樣硬化與易損斑塊的模型中的應(yīng)用。
8、本發(fā)明的目的是提供一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動脈粥樣硬化造模方法，該方法僅通過在apoe-/-小鼠飲水中添加食品級三氯蔗糖，同時聯(lián)合高脂飲食，即可增加小鼠的脂質(zhì)代謝壓力，加速動脈粥樣硬化斑塊的形成，從而解決傳統(tǒng)單純高脂飲食誘導(dǎo)模型所需時間長、結(jié)果不穩(wěn)定的問題。
9、為實現(xiàn)上述目的，具體的，本發(fā)明技術(shù)方案如下：
10、1.選擇8周齡雄性apoe-/-小鼠，經(jīng)1周適應(yīng)期后隨機分為實驗組和對照組；
11、2.對照組給予高脂飲食(hfd)飼喂，同時飲用純凈水；
12、3.實驗組在相同高脂飲食條件下，同時飲用添加有2％～3％w/v食品級三氯蔗糖的飲水；
13、4.干預(yù)周期為6～8周，期間定期記錄體重、攝食量、飲水量及血脂(如總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇和高密度膽固醇)等指標；
14、5.干預(yù)結(jié)束后，對小鼠主動脈及肝臟進行組織學檢測(包括he染色、油紅o染色和馬森染色)，并利用圖像分析軟件定量評估斑塊面積、成分及穩(wěn)定性。
15、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：
16、1.加速造模：僅在飲水中添加三氯蔗糖這一簡單飲食因素，即可在高脂飲食的基礎(chǔ)上顯著縮短動脈粥樣硬化斑塊形成時間，實驗周期縮短至6～8周；
17、2.模型穩(wěn)定：通過確定的三氯蔗糖濃度和干預(yù)時間，確保不同批次小鼠之間的造模結(jié)果一致性較高；
18、3.操作簡便：相較于需要手術(shù)或復(fù)雜基因操作的造模方法，本方法操作簡便，易于普及應(yīng)用；
19、4.研究意義：本發(fā)明公開了一種全新的飲食誘導(dǎo)造模方法，進一步豐富了利用飲食因素調(diào)控脂質(zhì)代謝和動脈粥樣硬化進程的研究手段，為后續(xù)藥物篩選及作用機制研究提供理想模型。
20、本專利技術(shù)通過在小鼠飲水中添加人工甜味劑三氯蔗糖，聯(lián)合高脂飲食條件對動脈粥樣硬化具有促進作用，且在文獻和公開專利中尚未發(fā)現(xiàn)將食品級三氯蔗糖用于apoe-/-小鼠造模的報道。
1.一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動脈粥樣硬化造模方法，其特征在于，采用載脂蛋白e基因敲除(apoe-/-)小鼠作為實驗動物，通過聯(lián)合給予高脂飲食和飲水中添加食品級三氯蔗糖來加速動脈粥樣硬化斑塊的形成；所述三氯蔗糖在飲水中的濃度為2％～3％w/v。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述apoe-/-小鼠造模步驟為8周齡雄性小鼠，經(jīng)過1周適應(yīng)期后分組試驗，其中對照組給予常規(guī)高脂飲食和純凈飲水，實驗組在相同高脂飲食條件下給予含有三氯蔗糖的飲水。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的步驟，其特征在于，所述apoe-/-小鼠造模干預(yù)周期為6～8周。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的步驟，其特征在于，所述高脂飲食中脂肪含量為15％，膽固醇含量為5％。
5.權(quán)利要求1或2所述的一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動脈粥樣硬化造模方法在制備研究動脈粥樣硬化與易損斑塊的模型中的應(yīng)用。